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緩沖液在實驗分析中的使用

文章出處:huifen 人氣: 发表时间:2016-09-01 17:23

        缓冲液(Buffer solution)通常是由「弱酸及其共轭堿」或「弱堿及其共轭酸」緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質時減緩pH的改變。以生物實驗中最常用的一種緩沖液PBS爲例,是由Na2HPO4KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0範圍內有較強的緩沖能力。

 

緩沖溶液的選擇與計算

 爲了保證緩沖溶液有足夠強的緩沖能力,在配制緩沖溶液時,需要做到:

1)爲使共轭酸堿對的濃度比接近于1,應根據所需要維持的pH範圍選擇合適的緩沖對,使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH,例如,生物培養液中需用PH=7.0的緩沖溶液,已知H2PO4-pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對。如若配制PH=9.0的緩沖溶液,則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(pKaNH4+=9.25)。可見弱酸的Ka是選擇緩沖溶液的主要依據,表中列出了幾種常用的緩沖溶液。

 

 

緩沖溶液的作用與使用中的注意事項

        緩沖溶液的作用是在有限的範圍內調整溶液的pH值使待測溶液的酸度符合分析方法所規定的範圍,例如,苯酚在堿性介質及鐵氰化鉀存在下,可與4-氨基安替比林反應生成橙紅色的安替比林染料,爲了防止芳香胺類的幹擾以pH100.2時最爲適宜。爲此就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調整和控制待測溶液的pH10.00.2

       在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,爲使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节, 以爲这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,結果卻適得其反,這樣的溶液pH值雖然調對了,可是它的緩沖體系卻被破壞了,作用也就失去了,緩沖溶液一般都是由弱酸及其弱酸鹽或是弱堿及其弱堿鹽組成的一對共轭體。

 

       使用缓冲溶液的注意事项:不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加试剂,具有简便准确误差恒定的特点,特别是在做成批样品时更显出它的优越性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,因该器皿不密闭易造成氨的揮發醋酸-醋酸鈉緩沖液中的醋酸也同理),從而,導致溶液失效,正確的做法是緩沖液應適量配制,使用後及時密閉並置于低溫中保存。